一九四一年，弗洛里与柴恩治疗了他们第一个病人。亚伯特.亚历山大（Albert Alexander）的脸部被玫瑰的刺刮伤。
霍华德‧华特‧弗洛里、恩斯特‧伯利斯‧柴恩，药理学家及化学家，与青霉素之父亚历山大‧弗莱明藉由青霉素的研究和量产，共同获得诺贝尔奖；青霉素即青霉素，最早发现的一种抗生素。
恩斯特·伯利斯·柴恩
亚历山大实在不幸，这玫瑰刺上有致命的细菌，导致伤口感染，还蔓延得很快。不出几天，他整张脸、头皮与眼睛严重肿胀。他眼睛感染的情况太严重，医师担心感染会蔓延到脑部，夺去他性命，遂执行眼球摘除术。
即使动了这么大的手术，仍没能遏止细菌蚕食鲸吞。亚历山大命在旦夕，又没有其他疗法，正是青霉素试验的不二人选。
弗洛里与柴恩把药物直接注入亚历山大的血液，不到二十四小时，他就出现起死回生的迹象。遗憾的是，弗洛里与柴恩一开始就用罄所有纯化的青霉素，今天我们已知这剂量太少、用药时间太短，不足以遏止这么严重的感染。
最初成效乐观，但好景不常，亚历山大又感染复发。虽然青霉素遏止部分细菌，但剩下的细菌仍无情进攻。几天后，亚历山大仍不敌病魔。弗洛里与柴恩明白，想完整测试抗生素的性质，就得设法做更多化合物。
柴恩与他的实验室
制造青霉素，唯一的已知方式是透过“表面发酵”（surface fermentation），也就是让产黄青霉菌在装了洋菜的培养皿上生长。弗洛里与柴恩使用床上便盆装满洋菜，增加表面积。但即使培养基扩大，仍无法大幅提高药物产量。
他们决定，先以孩童进行测试，因为孩童体形较娇小，需要的剂量较低。不久之后，弗洛里与柴恩就表示，青霉素能有效治疗多种细菌感染，前提是直接注射入血液（他们的芐青霉素制剂在口服时无法发挥功效），且剂量够高。然而高剂量的需求，使青霉素短缺的情况更恶化。
经过证实，青霉素是比洒尔佛散更好的神奇之钥，每家医院都极力争取，盼能在少得可怜的青霉素供给量中分到些许。在二次大战初期，青霉素最好的来源是已用这种药物治疗的患者尿液，因为病患尿液中，青霉素的活性化合物多半没什么变化。因此医护人员莫不竭尽所能，收集病人的每一滴尿液，重新利用里头珍贵的药物成分。
如何工业生产青霉素这立刻成为恼人的问题。那时英国正与纳粹德国交战，面临存亡关头。无论药物多重要，在激烈的战事中，英国已没有能力把有限的工业资源分一点给制药。
弗洛里的研究资助者洛克斐勒基金会（Rockefeller Foundation）鼓励他前往美国，寻求英国盟友的协助。在一九四一年七月，弗洛里飞到纽约，与政府机构和民营公司会面。弗洛里与英国相当幸运，因为美国农业部决定参与。
柴恩1944年在牛津大学进行一项实验
美国农业部已在伊利诺州的皮奥里亚（Peoria）实验室，以发酵法增加培养真菌的生长数量；此时皮奥里亚正设法增加产黄青霉菌的生长。
美国农业部的科学家做出两大贡献。首先，他们在皮奥里亚水果市场的发霉哈密瓜上，找到一种产黄青霉菌株，这种菌株跟其他产黄青霉菌株相比，能产生更多青霉素。第二，他们发现，在装了玉米浆（corn steep liquor，制作玉米粉时的便宜副产品）的深槽培养这种霉菌，并把空气打进充满霉菌的玉米浆（称为空气搅动（sparging）），则可快速生产更多青霉素。这种深槽生产法最大的优点，在于可推升产量。终于，他们促成了世界上第一种广效性抗生素的工业生产。
